戊型肝炎病毒IgM/IgG抗體檢測試劑注冊審查指導(dǎo)原則（2022年第36號）旨在指導(dǎo)注冊申請人對戊型肝炎病毒IgM/IgG抗體檢測試劑注冊申報資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時也為技術(shù)審評部門提供參考。本指導(dǎo)原則是對戊型肝炎病毒IgM/IgG抗體檢測試劑的一般要求，注冊申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用。
戊型肝炎病毒IgM/IgG抗體檢測試劑注冊審查指導(dǎo)原則
本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對戊型肝炎病毒IgM/IgG抗體檢測試劑注冊申報資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時也為技術(shù)審評部門提供參考。
本指導(dǎo)原則是對戊型肝炎病毒IgM/IgG抗體檢測試劑的一般要求，注冊申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用。若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料的內(nèi)容進(jìn)行充實和細(xì)化。
本指導(dǎo)原則是對注冊申請人和審查人員的指導(dǎo)性文件，但不包括注冊審批所涉及的行政事項，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，如果有能夠滿足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但需要提供詳細(xì)的研究資料和驗證資料，相關(guān)人員應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。
本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)體系以及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善，以及科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時進(jìn)行調(diào)整。
一、適用范圍
戊型肝炎病毒（hepatitis E virus，HEV）屬于戊型肝炎病毒科，是戊型肝炎的病原體。戊型肝炎病毒感染見于世界各地，傳播途徑主要是糞-口傳播，此外食用未煮熟的源自受感染的動物的肉、輸血和人畜交叉感染也是重要的傳播途徑。戊型肝炎通常具有自限性，2~6周就可自愈，部分發(fā)展成重型肝炎（急性肝衰竭）或慢性肝炎，嚴(yán)重可導(dǎo)致死亡。孕婦感染戊肝病毒后有較高的急性肝衰竭、流產(chǎn)和死亡風(fēng)險。戊型肝炎病毒引起的急性感染癥狀與甲型肝炎類似。
戊型肝炎病毒直徑約27~34nm，基因組為單股正鏈RNA，含有3個開放閱讀框架（ORF1、ORF2和ORF3）。與人類疾病相關(guān)的HEV主要有4個基因型，其中HEV-1和HEV-2僅見于人類，HEV-3、HEV-4在豬、野豬、鹿等若干動物中傳播，也可造成人類感染。但目前普遍認(rèn)為HEV只有一種血清型。
戊型肝炎的實驗室檢測方法包括肝功能指標(biāo)、抗原檢測、抗體檢測和核酸檢測。血清特異性抗體檢測是目前輔助診斷戊型肝炎的重要手段，免疫層析法、酶聯(lián)免疫法和化學(xué)發(fā)光法抗體檢測試劑在臨床中廣泛應(yīng)用。
本指導(dǎo)原則適用于以抗原抗體反應(yīng)為原理，包括免疫層析法、酶聯(lián)免疫法或化學(xué)發(fā)光法等，體外定性檢測人體樣本（如血清、血漿、全血）中的戊型肝炎病毒IgM和/或IgG抗體的試劑。結(jié)合臨床和其他實驗室指標(biāo)，可用于戊型肝炎病毒感染的輔助診斷。本指導(dǎo)原則適用于注冊申請和變更注冊申請的情形。本指導(dǎo)原則僅針對注冊申報資料中的部分內(nèi)容進(jìn)行撰寫，其他未盡事宜應(yīng)當(dāng)符合《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》（國家藥品監(jiān)督管理局公告2021年第122號）等相關(guān)法規(guī)要求。
二、注冊審查要點
（一）監(jiān)管信息
1. 產(chǎn)品名稱及分類編碼
產(chǎn)品名稱應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》（國家市場監(jiān)督管理總局令第48號）及相關(guān)法規(guī)的要求，如戊型肝炎病毒IgM抗體檢測試劑盒（化學(xué)發(fā)光法）。根據(jù)《體外診斷試劑分類規(guī)則》，該產(chǎn)品按照第三類體外診斷試劑管理，分類編碼為6840。
2. 其他信息還包括產(chǎn)品列表、關(guān)聯(lián)文件、申報前與監(jiān)管機(jī)構(gòu)的聯(lián)系情況和溝通記錄以及符合性聲明等文件。
（二）綜述資料
綜述資料主要包括產(chǎn)品預(yù)期用途、產(chǎn)品描述、有關(guān)生物安全性的說明、主要研究結(jié)果的總結(jié)評價以及同類產(chǎn)品上市情況介紹等內(nèi)容。產(chǎn)品描述中應(yīng)說明產(chǎn)品所采用的技術(shù)原理和特點。同類產(chǎn)品上市情況介紹部分應(yīng)著重從方法學(xué)、檢測原理、特異性抗原等主要組成成分、樣本類型等方面寫明擬申報產(chǎn)品與目前市場上已獲批準(zhǔn)的同類產(chǎn)品之間的主要區(qū)別。
（三）非臨床資料
1. 產(chǎn)品技術(shù)要求及檢驗報告
注冊申請人應(yīng)當(dāng)在原材料質(zhì)量和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定的前提下，根據(jù)產(chǎn)品研制、前期評價等結(jié)果，依據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及有關(guān)文獻(xiàn)資料，結(jié)合產(chǎn)品特性按照《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則》（2022年第8號）的要求編寫。該類產(chǎn)品作為第三類體外診斷試劑，應(yīng)當(dāng)以附錄形式明確主要原材料以及生產(chǎn)工藝要求。
如有適用的國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，產(chǎn)品技術(shù)要求的相關(guān)要求應(yīng)不低于相應(yīng)的要求。
戊型肝炎病毒IgM/IgG抗體檢測試劑的產(chǎn)品性能指標(biāo)應(yīng)主要包括：物理性狀、陽性參考品符合率、陰性參考品符合率、精密性、批間差、最低檢測限等。
如該項目已有國家標(biāo)準(zhǔn)品，技術(shù)要求中應(yīng)體現(xiàn)國家標(biāo)準(zhǔn)品的相關(guān)要求，并使用國家標(biāo)準(zhǔn)品對三批產(chǎn)品進(jìn)行檢驗。
2. 分析性能研究
注冊申請人應(yīng)提交在符合質(zhì)量管理體系的生產(chǎn)環(huán)境下生產(chǎn)的試劑進(jìn)行的所有性能評估資料，包括具體研究方法、實驗方案、實驗數(shù)據(jù)、統(tǒng)計分析等詳細(xì)資料。有關(guān)分析性能評估的背景信息也應(yīng)在申報資料中進(jìn)行描述，包括實驗地點，采用的試劑名稱、規(guī)格和批號，儀器名稱和型號，樣本類型和來源等。分析性能評估的實驗方法可以參考國際或國內(nèi)有關(guān)體外診斷試劑性能評估的指導(dǎo)原則進(jìn)行，建議著重對以下分析性能進(jìn)行研究。戊型肝炎病毒IgM和IgG抗體的性能應(yīng)分別研究。
2.1 樣本穩(wěn)定性
樣本穩(wěn)定性一般包括樣本各種實際運(yùn)輸及儲存（常溫、冷藏和冷凍）條件下的保存期限驗證，以確認(rèn)樣本的保存條件及保存時間。可以在合理的溫度范圍內(nèi)，每間隔一定的時間段即對儲存樣本進(jìn)行驗證，從而確認(rèn)不同類型樣本的穩(wěn)定性。可冷凍保存的樣本還應(yīng)對凍融次數(shù)進(jìn)行合理驗證。
2.2 適用的樣本類型
如產(chǎn)品同時適用于血清和血漿，可采用同源比對方式驗證樣本的可比性。
2.3 企業(yè)參考品檢驗
根據(jù)主要原材料研究資料中的企業(yè)參考品設(shè)置情況，采用至少三批產(chǎn)品對企業(yè)參考品進(jìn)行檢驗并提供詳細(xì)的實驗數(shù)據(jù)。
2.4 精密度
應(yīng)對精密度指標(biāo)，如標(biāo)準(zhǔn)差或變異系數(shù)等的評價標(biāo)準(zhǔn)做出合理要求。應(yīng)考慮運(yùn)行、時間、操作者、儀器、試劑批次和地點等影響精密度的條件，設(shè)計合理的精密度試驗方案進(jìn)行評價。
設(shè)定合理的精密度評價周期，例如：為期至少20天的檢測。至少采用3個水平的真實樣本進(jìn)行精密度評價。具體要求如下：
①陰性樣本：待測物濃度低于最低檢測限或為零濃度，陰性符合率應(yīng)為100%（n≥20）。
②臨界陽性樣本：待測物濃度略高于試劑的最低檢測限，陽性檢出率應(yīng)大于95%（n≥20）。
③中/強(qiáng)陽性樣本：待測物濃度呈中度到強(qiáng)陽性，陽性檢出率為100%，變異系數(shù)（CV）應(yīng)在合理的可接受范圍內(nèi)（n≥20），或條帶結(jié)果顯色均一。
2.5 包容性
應(yīng)選擇來源于不同時間、不同地域的多份臨床確診為戊型肝炎病毒抗體陽性的患者樣本、商業(yè)化血清盤進(jìn)行驗證，建議至少覆蓋HEV-1至HEV-4四個基因型，驗證內(nèi)容應(yīng)包括重復(fù)性、檢出限等，提供樣本及濃度的確認(rèn)方法、試驗數(shù)據(jù)。
2.6 最低檢測限
建議采用已明確戊型肝炎病毒抗體滴度的臨床陽性樣本，采用陰性樣本進(jìn)行系列稀釋，進(jìn)行最低檢測限的建立和驗證。應(yīng)采用合理方法確認(rèn)抗體類型和滴度，提供詳細(xì)的確認(rèn)方法及結(jié)果。
2.6.1最低檢測限的確定
建議選取不同來源的至少3份真實樣本，系列稀釋獲得多個濃度梯度，每個濃度重復(fù)檢測不少于3次，以100%可檢出的最低濃度水平作為預(yù)設(shè)檢測限。在此濃度附近制備若干濃度梯度樣品，每個濃度至少重復(fù)檢測20次，將具有95%以上陽性檢出率的最低濃度作為最低檢測限。
2.6.2最低檢測限的驗證
選擇與確定樣本不同的3份真實樣本，采用陰性樣本稀釋到最低檢測限濃度水平，重復(fù)檢測多次進(jìn)行驗證，應(yīng)達(dá)到95%以上陽性檢出率。
2.7 分析特異性
2.7.1 交叉反應(yīng)
應(yīng)對戊型肝炎病毒的近緣微生物抗體，易引起相同或相似的臨床癥狀，及易合并感染的微生物抗體進(jìn)行交叉反應(yīng)驗證。如人類EB病毒（EBV）、巨細(xì)胞病毒（CMV）、人類免疫缺陷病毒（HIV）、甲型肝炎病毒（HAV）、乙型肝炎病毒（表面抗原/抗體、e抗原/抗體、核心抗體）、丙型肝炎病毒（HCV）等。同時進(jìn)行高濃度戊型肝炎病毒特異性IgG抗體和IgM抗體之間的交叉反應(yīng)驗證。
如果試劑原料采用基因重組抗原，則還需考慮對重組基因?qū)胛⑸锾禺愋钥贵w的交叉反應(yīng)評價。例如采用大腸埃希菌作為宿主菌進(jìn)行重組抗原的表達(dá)，建議考慮大腸埃希菌抗體陽性樣本可能產(chǎn)生的交叉反應(yīng)。
交叉反應(yīng)用臨床樣本中相關(guān)病原體抗體滴度水平應(yīng)較高，并且抗體類型（IgM、IgG）應(yīng)與申報試劑檢測抗體類型一致。提供所有用于交叉反應(yīng)驗證的樣本來源、陰陽性和滴度確認(rèn)等信息。
2.7.2干擾試驗
應(yīng)根據(jù)所采集樣本類型，選擇適用的干擾物質(zhì)進(jìn)行研究。建議在每種干擾物質(zhì)的潛在最大濃度（“最差條件”）下，采用待測抗體為弱陽性和陰性水平的多例樣本進(jìn)行試驗，應(yīng)至少包括下列可能的干擾物質(zhì)。
2.7.2.1 內(nèi)源性干擾物質(zhì)：血紅蛋白、膽紅素、脂類、類風(fēng)濕因子、其他自身免疫性抗體，異嗜性抗體（如HAMA）、總IgG、總IgM、高濃度戊型肝炎病毒特異性IgG抗體與特異性IgM抗體。
2.7.2.2常見治療性藥物：不同種類的抗菌藥物、干擾素、常見的抗病毒藥物、癥狀相關(guān)其他經(jīng)驗性藥物等。
2.7.2.3抗凝劑：如果試劑盒適用樣本類型包括血漿（全血）樣本，可采用一定數(shù)量同源樣本通過比對試驗的方法，驗證各種抗凝劑的適用性。
2.8 IgM抗體破壞試驗
對于戊型肝炎病毒IgM抗體檢測試劑，建議對至少5份含有戊型肝炎病毒特異性IgM抗體的樣本進(jìn)行IgM破壞實驗研究，方法為采用特定的化學(xué)制劑（如2－巰基乙醇或二硫蘇糖醇）處理樣本后，重新進(jìn)行檢測，IgM檢測結(jié)果應(yīng)為陰性。
2.9 鉤狀（HOOK）效應(yīng)
須采用多份高滴度樣本進(jìn)行梯度稀釋后由低濃度至高濃度分別檢測，每個梯度的稀釋液重復(fù)3～5次，對鉤狀效應(yīng)進(jìn)行研究。
2.10 其他需注意問題
對于使用儀器進(jìn)行結(jié)果判讀的產(chǎn)品，應(yīng)提供產(chǎn)品說明書【適用機(jī)型】項中所有型號儀器的性能評估資料。
2.11 反應(yīng)體系
反應(yīng)體系研究資料包括樣本的制備方式（采集和處理）、樣本要求、樣本用量、試劑用量、反應(yīng)條件、質(zhì)控方法、結(jié)果判讀方式等。
反應(yīng)條件確定：注冊申請人應(yīng)考慮反應(yīng)時間、判讀時間、反應(yīng)溫度、洗滌液體積和洗滌次數(shù)（如涉及）等條件對產(chǎn)品性能的影響，通過實驗確定上述條件的最佳組合。
反應(yīng)體系中樣品加樣方式及加樣量確定：通過實驗確定最佳的加樣方式及加樣量。如樣本需采取稀釋或其他必要的方法進(jìn)行處理后方可用于最終檢測，注冊申請人還應(yīng)對樣本稀釋液及其用量、其他必要的處理方法等進(jìn)行研究。對于IgM抗體檢測試劑，如采用間接法，建議考慮高濃度特異性IgG對結(jié)果的影響，合理設(shè)置IgG去除相關(guān)樣本處理步驟（例如采用含有IgG吸附劑的樣本稀釋液等），或者詳述產(chǎn)品設(shè)計中關(guān)于避免IgG影響IgM檢測結(jié)果的合理措施，盡量減少特異性IgG對IgM檢測造成的假陰性和假陽性。
3. 穩(wěn)定性研究
主要包括實時穩(wěn)定性（有效期）、開瓶（開封）穩(wěn)定性、凍融穩(wěn)定性（如涉及）、機(jī)載穩(wěn)定性（如涉及）、運(yùn)輸穩(wěn)定性等研究。如果產(chǎn)品配套校準(zhǔn)品，還應(yīng)對校準(zhǔn)頻率進(jìn)行研究。可根據(jù)實際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括研究方法的確定依據(jù)、具體的實施方案、詳細(xì)的研究數(shù)據(jù)以及結(jié)論。對于實時穩(wěn)定性研究，應(yīng)提供至少三批樣品在實際儲存條件下保存至成品有效期后的研究資料。
4. 陽性判斷值研究
提交對申報試劑陰性/陽性結(jié)果判斷的陽性判斷值（cut-off）確定資料，包括具體的試驗方案、人群及樣本選擇、評價標(biāo)準(zhǔn)、統(tǒng)計學(xué)分析和研究數(shù)據(jù)等。建立陽性判斷值的樣本選擇應(yīng)考慮不同的地理區(qū)域、不同的感染階段和生理狀態(tài)等因素的影響，納入陰性、陽性及臨界值附近的樣本。如檢測結(jié)果為數(shù)值形式，建議采用受試者工作特征曲線（receiver operating characteristic curve，ROC）的分析方式來確定合理的陽性判斷值；如試驗結(jié)果存在灰區(qū)（equivocal zone），應(yīng)提供灰區(qū)建立的依據(jù)。
如產(chǎn)品適用多個樣本類型，應(yīng)明確不同的樣本類型是否存在差異。如有差異，應(yīng)分別進(jìn)行陽性判斷值的確定。
5. 其他資料
5.1主要原材料研究資料
此類產(chǎn)品的主要原材料一般包括抗原、抗體、對照品/質(zhì)控品/校準(zhǔn)品和企業(yè)參考品等。應(yīng)提供主要原材料的選擇與來源、制備過程、質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)等相關(guān)研究資料。如主要原材料為自制，應(yīng)提供其詳細(xì)制備過程；如主要原材料源于外購，應(yīng)提供資料包括：選擇該原材料的依據(jù)及對比篩選試驗資料、供應(yīng)商提供的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、出廠檢驗報告，以及該原材料到貨后的質(zhì)量檢驗資料，供應(yīng)商應(yīng)固定，不得隨意更換。
5.1.1戊型肝炎病毒抗原
應(yīng)注重抗原表位的選擇，原材料研究資料中應(yīng)將此方面的考慮進(jìn)行詳述。詳細(xì)描述抗原的名稱，天然/重組表達(dá)信息及選擇該抗原的依據(jù)。提交抗原來源、生產(chǎn)商選擇、制備、純化、鑒定、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（外觀、蛋白濃度、純度、分子量、功能性試驗等）及檢驗等詳細(xì)試驗資料。
5.1.2 抗人IgM/IgG抗體
詳述抗體的選擇過程，提交抗體生物學(xué)來源、免疫原及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（外觀、蛋白濃度、純度、分子量、效價、功能性試驗等）等詳細(xì)試驗資料。
5.1.3 質(zhì)控線/對照品/質(zhì)控品
免疫層析方法學(xué)的產(chǎn)品一般應(yīng)設(shè)置質(zhì)控線，詳述質(zhì)控線相關(guān)原材料（例如抗體）的來源、選擇依據(jù)和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
對照品/質(zhì)控品應(yīng)至少包含陰性和陽性兩個水平。陽性對照品/質(zhì)控品可選擇經(jīng)合理稀釋的臨床陽性樣本或人源化抗體，陰性對照品/質(zhì)控品可選擇臨床陰性樣本或陰性基質(zhì)等。提交相關(guān)原料的來源、選擇和陰陽性確認(rèn)等相關(guān)研究資料。應(yīng)對對照品/質(zhì)控品的檢測結(jié)果做出明確的范圍要求。
5.1.4 其他主要原材料
除上述主要原材料外，產(chǎn)品中包含的其他主要原材料，如膠體金、辣根過氧化物酶、吖啶酯、硝酸纖維素膜、微孔板、磁微粒、樣本稀釋液等，均應(yīng)進(jìn)行驗證，并提交相關(guān)資料。明確主要原材料的供應(yīng)商和質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。免疫層析方法學(xué)的產(chǎn)品如適用于全血，應(yīng)介紹血細(xì)胞去除方式及相關(guān)原材料，并驗證去除效果。
5.1.5 企業(yè)參考品
應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的實際情況，科學(xué)、合理的設(shè)定企業(yè)參考品。提交企業(yè)參考品的原料來源、選擇、制備、陰陽性及濃度/滴度確認(rèn)方法或試劑等相關(guān)驗證資料。企業(yè)參考品的基質(zhì)應(yīng)與待測樣本相同。企業(yè)參考品的設(shè)置應(yīng)至少包括：陽性參考品、陰性參考品、檢測限參考品和重復(fù)性參考品。其中陽性參考品重在評估產(chǎn)品的包容性，應(yīng)選擇不同來源的臨床樣本，并設(shè)置不同滴度水平。陰性參考品應(yīng)可評價產(chǎn)品的特異性，應(yīng)包含可能的干擾和交叉樣本，對于檢測戊型肝炎病毒IgM抗體的試劑，陰性參考品中建議包括戊型肝炎病毒IgG抗體陽性樣本。檢測限參考品可設(shè)置臨床陽性樣本的系列稀釋樣本，其中應(yīng)包含最低檢測限水平。重復(fù)性參考品可設(shè)置至少兩個水平的臨床陽性樣本,包括最低檢測限附近濃度。對于同時檢測戊型肝炎病毒IgM和IgG抗體的試劑，企業(yè)參考品需對IgM抗體和IgG抗體分別設(shè)置。
5.2 生產(chǎn)工藝研究資料
5.2.1 產(chǎn)品基本反應(yīng)原理介紹。
5.2.2 主要生產(chǎn)工藝介紹，可用流程圖方式表示，并簡要說明主要生產(chǎn)工藝的確定依據(jù)。
5.2.3 包被/標(biāo)記工藝研究，應(yīng)考慮如包被/標(biāo)記液量、濃度、時間、PH值、標(biāo)記比率等指標(biāo)對產(chǎn)品性能的影響，通過實驗確定上述指標(biāo)的最佳組合。
5.2.4 顯色系統(tǒng)、酶作用底物等的介紹以及最適條件研究。
（四）臨床試驗
臨床試驗的開展、方案的制定以及報告的撰寫等均應(yīng)符合相關(guān)法規(guī)及《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求。
1.研究方法
該類產(chǎn)品臨床試驗建議采用觀察性研究。臨床試驗可采用試驗體外診斷試劑與已上市同類產(chǎn)品（對比試劑）進(jìn)行比較研究，評價兩種方法檢測結(jié)果的一致性，評價指標(biāo)通常包括陽性符合率、陰性符合率等。對比試劑在預(yù)期用途、適用人群、樣本類型、檢測方法學(xué)、檢測性能等方面應(yīng)與試驗體外診斷試劑具有較好的可比性。
如試驗體外診斷試劑在該類產(chǎn)品現(xiàn)有的臨床預(yù)期用途下，有新的臨床預(yù)期用途（如：定量檢測產(chǎn)品的治療效果監(jiān)測等），應(yīng)采用試驗體外診斷試劑與臨床參考標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較研究，對產(chǎn)品新預(yù)期用途進(jìn)行臨床評價。臨床參考標(biāo)準(zhǔn)是指現(xiàn)有條件下臨床上可獲得的能夠用來確定受試者目標(biāo)狀態(tài)的最佳方法，通常來自臨床和實驗室的醫(yī)學(xué)實踐，包括患者跟蹤隨訪等。
如試驗體外診斷試劑性能優(yōu)于已上市同類產(chǎn)品，如產(chǎn)品靈敏度顯著高于已上市同類產(chǎn)品，可將試驗體外診斷試劑與臨床參考標(biāo)準(zhǔn)的比較研究和試驗體外診斷試劑與境內(nèi)已上市同類產(chǎn)品的比較研究相結(jié)合，對產(chǎn)品的臨床性能進(jìn)行綜合評價，從而支持預(yù)期用途所聲稱的內(nèi)容。
2.受試者選擇及樣本收集
臨床試驗方案中應(yīng)根據(jù)試驗體外診斷試劑的預(yù)期用途、目標(biāo)人群和檢測要求等合理確定臨床試驗受試者的選擇要求和樣本收集方法，包括：受試者入組/排除標(biāo)準(zhǔn)等。
根據(jù)產(chǎn)品臨床試驗的目的，應(yīng)入組戊型肝炎病毒感染的疑似人群，包含不同年齡段、不同性別人群。入組人群應(yīng)具有戊型病毒性肝炎的流行病學(xué)史或臨床表現(xiàn)，同時根據(jù)臨床確認(rèn)的需要，入組病例應(yīng)包括不同疾病分期（如：急性期、恢復(fù)期等）的患者。如試驗體外診斷試劑聲稱可適用于“疾病監(jiān)測”，臨床試驗應(yīng)入組符合要求的病例，進(jìn)行患者跟蹤隨訪研究。
臨床試驗中所涉及的樣本類型應(yīng)為實際臨床檢測中常用的樣本類型。如試驗體外診斷試劑所適用的不同樣本類型在樣本基質(zhì)、被測物來源、被測物濃度水平、干擾因素以及采樣部位等方面幾乎沒有差異，且經(jīng)臨床前研究證明分析性能沒有差異，例如某些檢測中的血清和血漿樣本，則臨床試驗中不同樣本類型可進(jìn)行匯總統(tǒng)計。
3.臨床試驗機(jī)構(gòu)數(shù)量和要求
該類產(chǎn)品臨床試驗應(yīng)在不少于3家（含3家）符合要求的臨床試驗機(jī)構(gòu)開展。申辦者應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品特點及其預(yù)期用途，綜合不同地區(qū)戊型肝炎病毒流行情況等因素選擇具有代表性的機(jī)構(gòu)開展臨床試驗，包括受試人群的代表性等。
4.臨床評價指標(biāo)
該類產(chǎn)品臨床評價指標(biāo)主要包括試驗體外診斷試劑與已上市同類產(chǎn)品相比的陽性符合率、陰性符合率等。如試驗體外診斷試劑與臨床參考方法進(jìn)行對比研究，其臨床評價標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)包括臨床靈敏度、臨床特異度等。
5.臨床試驗樣本量估算
適當(dāng)?shù)臉颖玖渴潜ＷC試驗體外診斷試劑臨床性能得到準(zhǔn)確評價的必要條件。臨床試驗樣本量應(yīng)滿足統(tǒng)計學(xué)要求，可采用適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計學(xué)方法進(jìn)行估算。
樣本量估算過程中需要考慮臨床試驗中病例的剔除率，一般而言，病例剔除率不應(yīng)高于10%。
臨床試驗樣本量除需滿足上述統(tǒng)計學(xué)估算的最低樣本量要求外，還應(yīng)保證入組受試者特征及分布符合預(yù)期適用人群。
6.統(tǒng)計分析
臨床試驗統(tǒng)計分析，應(yīng)與臨床試驗?zāi)康囊恢拢缗R床試驗?zāi)康臑轵炞C試驗體外診斷試劑與已上市產(chǎn)品的一致性，統(tǒng)計分析一般以2×2表的形式總結(jié)兩種分析方法的檢測結(jié)果，并據(jù)此計算陽性符合率、陰性符合率、總符合率、Kappa值等指標(biāo)及其95%置信區(qū)間。
（五）產(chǎn)品說明書
產(chǎn)品說明書是體外診斷試劑注冊申報最重要的文件之一。產(chǎn)品說明書的格式應(yīng)符合《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》（原國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第17號）的要求，進(jìn)口體外診斷試劑的中文說明書除格式要求外，其內(nèi)容應(yīng)盡量保持與原文說明書的一致性，翻譯力求準(zhǔn)確且符合中文表達(dá)習(xí)慣。產(chǎn)品說明書中相關(guān)技術(shù)內(nèi)容均應(yīng)與注冊申請人提交的注冊申報資料中的相關(guān)研究結(jié)果保持一致，如某些內(nèi)容引用自參考文獻(xiàn)，則應(yīng)以規(guī)范格式對此內(nèi)容進(jìn)行標(biāo)注，并單獨(dú)列明文獻(xiàn)的相關(guān)信息。
結(jié)合《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》的要求，戊型肝炎病毒IgM/IgG抗體檢測試劑說明書編寫應(yīng)重點關(guān)注以下內(nèi)容。
1．【預(yù)期用途】
1.1該產(chǎn)品用于體外定性檢測人××（如血清、血漿、全血等）樣本中的戊型肝炎病毒IgM/IgG抗體。
1.2結(jié)合臨床和其他實驗室指標(biāo)，用于戊型肝炎病毒感染的輔助診斷。
1.3臨床背景描述：簡單介紹病原體的生物學(xué)特征、流行病學(xué)、潛伏期、易感人群、感染后的臨床表現(xiàn)及相關(guān)疾病等。簡要介紹現(xiàn)有的戊型肝炎病毒臨床或?qū)嶒炇以\斷方法。
2.【樣本要求】重點明確以下內(nèi)容：
2.1樣本采集：明確采集時間、采集順序、采集量等，是否受臨床癥狀、用藥情況等因素的影響。說明采集方法及樣本類型，對于血漿等樣本，應(yīng)注明對抗凝劑的要求。
2.2干擾物的影響：明確常見干擾物對實驗結(jié)果是否產(chǎn)生影響，明確可接受的最大干擾物濃度。
2.3樣本處理及保存：樣本處理方法、保存條件（如冷藏、冷凍等）及不同保存條件下的保存時限和運(yùn)輸條件等。冷藏、冷凍樣本檢測前是否需要恢復(fù)室溫，冷凍樣本的凍融次數(shù)限制等。
3.【檢驗方法】
詳細(xì)說明試驗操作的各個步驟：
3.1實驗環(huán)境：實驗室的溫度、濕度要求，檢測試劑及樣本的復(fù)溫要求等。
3.2試劑配制方法，試劑開封后使用方法等。
3.3高濃度樣本稀釋的方法。
3.4試驗條件：操作步驟、溫度、時間、儀器波長等。
3.5質(zhì)量控制：操作步驟，質(zhì)控結(jié)果的要求（試驗有效性的判斷），質(zhì)控結(jié)果不符合要求的處理方式。
3.6對于免疫層析法檢測試劑可以圖示形式顯示正確的檢驗操作方法、程序等。特別注意應(yīng)強(qiáng)調(diào)操作溫度及濕度條件、讀取結(jié)果的時間。
3.7特別說明檢驗操作過程中的注意事項。
4.【陽性判斷值】說明陽性判斷值，并簡要說明陽性判斷值確定的試驗方法。如陽性判斷值需進(jìn)行計算確定，詳細(xì)描述具體計算方法。
5.【檢驗結(jié)果的解釋】
結(jié)合質(zhì)控線/對照品/質(zhì)控品以及樣本的檢測結(jié)果，對所有可能出現(xiàn)的結(jié)果組合及相應(yīng)的解釋進(jìn)行詳述。對于免疫層析法檢測試劑可采用圖示形式顯示檢測結(jié)果。檢驗結(jié)果的解釋應(yīng)以陽性判斷值的研究結(jié)論為依據(jù)。如有適用的臨床診療指南，則應(yīng)在此項下引用，相應(yīng)檢驗結(jié)果的解釋應(yīng)符合相關(guān)指南的要求。如有灰區(qū)判定，詳細(xì)說明灰區(qū)樣本的處理方法。
6.【檢驗方法局限性】
綜合產(chǎn)品的預(yù)期用途、臨床背景、檢測方法及適用范圍等信息，對可能出現(xiàn)的局限性進(jìn)行相關(guān)說明，建議包括以下內(nèi)容：
6.1本試劑盒的檢測結(jié)果不得作為臨床診治的唯一依據(jù)，對患者的臨床管理應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他實驗室檢查及治療反應(yīng)等情況綜合考慮。
6.2不合理的樣本采集、轉(zhuǎn)運(yùn)、處理及不當(dāng)?shù)膶嶒灢僮骱蛯嶒灜h(huán)境均有可能導(dǎo)致假陰性或假陽性結(jié)果。
6.3感染初期，IgM抗體可能未產(chǎn)生或者產(chǎn)生水平低于產(chǎn)品最低檢測限，而產(chǎn)生陰性結(jié)果。檢測陰性不能排除急性感染，對于可疑的樣本建議進(jìn)行進(jìn)一步檢測，或至少間隔7天再次檢測。
6.4在近幾個月內(nèi)接受過輸血或其他血液制品治療的人群，對其陽性檢測結(jié)果的分析應(yīng)慎重。
6.5免疫功能受損人群或戊型肝炎慢性感染人群，其血清學(xué)抗體檢測的參考價值有限，可能會導(dǎo)致錯誤的醫(yī)學(xué)解釋。
7.【產(chǎn)品性能指標(biāo)】
詳述以下性能指標(biāo)：企業(yè)參考品符合率、最低檢測限、包容性、精密度、特異性（交叉反應(yīng)和干擾試驗）、鉤狀（HOOK）效應(yīng)。介紹所用樣本背景信息、數(shù)量、濃度，評價方法及檢測結(jié)果。
8.【注意事項】
應(yīng)至少包括以下內(nèi)容：
8.1有關(guān)試劑盒內(nèi)人源組分（如有）生物安全性的警告。如：試劑盒內(nèi)對照品（質(zhì)控品）或其他可能含有人源物質(zhì)的組分，雖已經(jīng)通過了乙型肝炎病毒表面抗原（HBs-Ag）、人類免疫缺陷病毒1/2型抗體（HIV1/2-Ab）、丙型肝炎病毒抗體（HCV-Ab）等項目的檢測，結(jié)果為陰性，但截至目前，沒有任何一項檢測可以確保絕對安全，故仍應(yīng)將這些組分作為潛在傳染源對待。
8.2有關(guān)實驗操作、樣本保存及處理等其他注意事項。
三、參考文獻(xiàn)
[1]體外診斷試劑注冊與備案管理辦法[Z]（國家市場監(jiān)督管理總局令第48號）.
[2]體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則[Z]（國家藥監(jiān)局2021年第72號公告）.
[3]體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則[Z]（原國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告2014年第17號）.
[4]關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告[Z]（國家藥品監(jiān)督管理局公告2021年第122號）.
[5]戊型病毒性肝炎診療規(guī)范.中國醫(yī)師協(xié)會感染科醫(yī)師分會.中華臨床感染病雜志, 2009.
[6]戊型病毒性肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn).中華人民共和國衛(wèi)生部, 2008.