PD-L1檢測(cè)試劑臨床試驗(yàn)—結(jié)果重現(xiàn)性研究注冊(cè)審查指導(dǎo)原則
一、前言
近年來(lái)，以程序性細(xì)胞死亡蛋白1 (Programmed cell death protein 1, PD-1)/程序性死亡配體1 (Programmed death-ligand 1, PD-L1)免疫檢查點(diǎn)抑制劑為主的免疫治療在多個(gè)惡性腫瘤中取得了突破性進(jìn)展，一系列抗腫瘤藥物應(yīng)用于臨床。PD-L1檢測(cè)試劑是目前應(yīng)用最為廣泛的免疫治療適宜人群篩選和療效預(yù)測(cè)的生物標(biāo)志物。免疫組織化學(xué)（immunohistochemistry，IHC，簡(jiǎn)稱“免疫組化”）檢測(cè)是評(píng)估腫瘤組織PD-L1表達(dá)狀態(tài)的一種有效且常用的方法，廣泛應(yīng)用于多種惡性腫瘤中，以識(shí)別或輔助預(yù)測(cè)可能從免疫治療中獲益的患者。
基于免疫組化法的PD-L1檢測(cè)試劑操作程序和結(jié)果判讀較為復(fù)雜，該類檢測(cè)試劑臨床應(yīng)用的準(zhǔn)確性與重復(fù)性是產(chǎn)品重要的臨床性能，本指導(dǎo)原則旨在規(guī)范產(chǎn)品檢測(cè)結(jié)果重現(xiàn)性臨床研究的開(kāi)展。
本指導(dǎo)原則是針對(duì)PD-L1檢測(cè)試劑結(jié)果重現(xiàn)性臨床研究的一般要求，申請(qǐng)人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用。該文件為供申請(qǐng)人和審查人員使用的指導(dǎo)性文件，不涉及注冊(cè)審批等行政事項(xiàng)，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，如有能夠滿足法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但應(yīng)提供詳細(xì)的研究資料。本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本文件相關(guān)內(nèi)容也將適時(shí)進(jìn)行調(diào)整。
二、適用范圍
本指導(dǎo)原則適用于基于免疫組化法的PD-L1檢測(cè)試劑，該類產(chǎn)品用于定性檢測(cè)人中性福爾馬林固定石蠟包埋（FFPE）的腫瘤組織中PD-L1蛋白的表達(dá)水平。
三、臨床試驗(yàn)要求
PD-L1檢測(cè)試劑結(jié)果重現(xiàn)性臨床研究包括兩部分內(nèi)容：環(huán)比試驗(yàn)與閱片一致性研究。臨床試驗(yàn)的開(kāi)展、方案的制定以及報(bào)告的撰寫等均應(yīng)符合相關(guān)法規(guī)及《體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求。
（一）臨床試驗(yàn)設(shè)計(jì)
1．環(huán)比試驗(yàn)（Ring study）
環(huán)比試驗(yàn)是從病理切片開(kāi)始，按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行樣本處理、染色及結(jié)果判讀，評(píng)價(jià)各臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)對(duì)同一樣本集從染色到結(jié)果判斷的一致性。
環(huán)比試驗(yàn)應(yīng)選擇至少三家臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)開(kāi)展，試驗(yàn)所需的病例為三家臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)共同提供的樣本組成的樣本集。在樣本集構(gòu)建過(guò)程中，每家臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)提供的陽(yáng)性病例、陰性病例及總病例數(shù)應(yīng)相對(duì)均衡。每個(gè)病例應(yīng)至少提供足夠三次按照申報(bào)產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)進(jìn)行檢測(cè)的病理切片數(shù)量。
臨床試驗(yàn)牽頭單位研究者將樣本集中每一病例的病理切片分配至每家臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)，保證每家臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)均能夠?qū)υ摬±凑丈陥?bào)產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)進(jìn)行至少一次染色并報(bào)告結(jié)果。因此，每家臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)均能對(duì)樣本集中所有病例的病理切片進(jìn)行染色及結(jié)果判讀。
各臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)收到臨床試驗(yàn)牽頭單位分配的病理切片后，選擇具有一定資歷的研究者，按照申報(bào)產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的要求對(duì)病理切片進(jìn)行染色及結(jié)果判讀。針對(duì)整個(gè)樣本集的染色建議盡快完成。三家臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)通過(guò)對(duì)樣本集中病理切片進(jìn)行染色及判讀，最終各機(jī)構(gòu)的數(shù)據(jù)形成環(huán)比試驗(yàn)的數(shù)據(jù)集，用于后續(xù)統(tǒng)計(jì)分析。環(huán)比試驗(yàn)設(shè)計(jì)見(jiàn)圖1。
2．閱片一致性研究
閱片一致性研究的對(duì)象為經(jīng)申報(bào)產(chǎn)品按照產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)進(jìn)行染色的病理切片，各臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)研究者根據(jù)產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)中結(jié)果判讀方法對(duì)切片進(jìn)行判讀，評(píng)價(jià)不同研究者對(duì)染色切片判讀結(jié)果的一致性。
閱片一致性研究應(yīng)選擇至少三家臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)，研究?jī)?nèi)容包括：機(jī)構(gòu)內(nèi)同一病理醫(yī)師閱片一致性研究、機(jī)構(gòu)內(nèi)不同病理醫(yī)師閱片一致性研究、不同機(jī)構(gòu)間病理醫(yī)師閱片一致性研究。各臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)可根據(jù)臨床試驗(yàn)內(nèi)容，在科學(xué)設(shè)計(jì)的前提下將上述閱片一致性研究合并進(jìn)行，但應(yīng)在臨床試驗(yàn)方案中明確各機(jī)構(gòu)不同研究者參與的具體研究?jī)?nèi)容，臨床試驗(yàn)應(yīng)嚴(yán)格按照臨床試驗(yàn)方案進(jìn)行。
2.1機(jī)構(gòu)內(nèi)同一病理醫(yī)師閱片一致性研究
機(jī)構(gòu)內(nèi)同一病理醫(yī)師閱片一致性研究應(yīng)在三家臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)開(kāi)展，每家臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)針對(duì)本機(jī)構(gòu)所提供的臨床試驗(yàn)所需的已完成染色的病理切片進(jìn)行本研究。用于臨床試驗(yàn)的病理切片應(yīng)包括判讀結(jié)果為陽(yáng)性的切片及判讀結(jié)果為陰性的切片。
每家臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)選擇一名一定資歷的病理醫(yī)師對(duì)該機(jī)構(gòu)入組的所有病理切片進(jìn)行3次判讀，每次判讀間隔一定的時(shí)間，同一病理醫(yī)師的不同次閱片結(jié)果組成分析數(shù)據(jù)集。機(jī)構(gòu)內(nèi)同一病理醫(yī)師閱片一致性試驗(yàn)設(shè)計(jì)如圖2。
2.2機(jī)構(gòu)內(nèi)不同病理醫(yī)師閱片一致性研究
機(jī)構(gòu)內(nèi)不同病理醫(yī)師閱片一致性研究應(yīng)在三家臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)開(kāi)展。每家臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)針對(duì)本機(jī)構(gòu)所提供的臨床試驗(yàn)所需的已完成染色的病理切片進(jìn)行本研究。用于臨床試驗(yàn)的病理切片應(yīng)包括判讀結(jié)果為陽(yáng)性的切片及判讀結(jié)果為陰性的切片。
每家臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)選擇3名不同資歷的病理醫(yī)師參與臨床試驗(yàn)，臨床試驗(yàn)過(guò)程中由每名病理醫(yī)師對(duì)該機(jī)構(gòu)入組的所有病理切片進(jìn)行判讀，所有病理醫(yī)師的閱片結(jié)果組成分析數(shù)據(jù)集。機(jī)構(gòu)內(nèi)不同病理醫(yī)師閱片一致性試驗(yàn)設(shè)計(jì)如圖3。
2.3不同機(jī)構(gòu)間病理醫(yī)師閱片一致性
不同機(jī)構(gòu)間病理醫(yī)師閱片一致性研究應(yīng)在三家臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)開(kāi)展。臨床試驗(yàn)所需病理切片為三家臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)共同提供的切片組成的切片集，在切片集構(gòu)建過(guò)程中，每家臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)提供的陽(yáng)性切片、陰性切片及總切片數(shù)應(yīng)相對(duì)均衡。每張病理切片應(yīng)為按照申報(bào)產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)進(jìn)行染色的病理切片。
各臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)根據(jù)臨床試驗(yàn)進(jìn)展開(kāi)展切片集的閱片，建議每家臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)完成全部閱片后，再將切片集轉(zhuǎn)運(yùn)至下一家機(jī)構(gòu)。保證每家臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)研究者均能對(duì)切片集中所有病例的病理切片根據(jù)產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行結(jié)果判讀。
各臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)收到切片集后，選擇具有一定資歷的研究者，按照申報(bào)產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的要求對(duì)病理切片進(jìn)行結(jié)果判讀。三家臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)對(duì)切片集中所有病理切片判讀，最終各結(jié)構(gòu)的數(shù)據(jù)形成閱片一致性研究的數(shù)據(jù)集，用于后續(xù)統(tǒng)計(jì)分析。不同機(jī)構(gòu)間病理醫(yī)師閱片一致性試驗(yàn)設(shè)計(jì)如圖4。
（二）受試者選擇及樣本收集
環(huán)比試驗(yàn)與閱片一致性研究入組的受試者應(yīng)為產(chǎn)品預(yù)期適用人群，如待評(píng)價(jià)產(chǎn)品PD-L1檢測(cè)試劑盒預(yù)期用途為定性檢測(cè)中性福爾馬林固定石蠟包埋（FFPE）的食管鱗狀細(xì)胞癌（ESCC）組織中的PD-L1蛋白表達(dá)，則入組病例應(yīng)為臨床明確診斷為食管鱗狀細(xì)胞癌的病例。
為了更加科學(xué)的評(píng)價(jià)產(chǎn)品性能，各部分研究均應(yīng)包含部分PD-L1表達(dá)陽(yáng)性閾值臨近范圍內(nèi)病例（用于指導(dǎo)抗腫瘤藥物使用的閾值），該部分病例所占比例應(yīng)不少于陽(yáng)性病例的30%。
（三）機(jī)構(gòu)和人員
臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)應(yīng)獲得國(guó)家藥品監(jiān)督管理局備案認(rèn)可。臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)應(yīng)具有嚴(yán)格的質(zhì)量管理體系，執(zhí)行實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部日常質(zhì)量控制。
臨床試驗(yàn)中應(yīng)根據(jù)試驗(yàn)設(shè)計(jì)設(shè)定不同資歷的病理醫(yī)師參與試驗(yàn)，病理醫(yī)師資歷劃分應(yīng)合理。
（四）樣本量估算
臨床試驗(yàn)應(yīng)進(jìn)行科學(xué)的樣本量估算，建議采用參數(shù)估計(jì)的方法估算樣本量，樣本量估算過(guò)程建議設(shè)定合理置信水平和允許誤差。可采用如下公式：
公式中n為樣本量，Z1-α/2為置信度標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)分布的分位數(shù)，P為評(píng)價(jià)指標(biāo)預(yù)期值，Δ為P的允許誤差大小。
如研究者采用其他的合理的樣本量估算模型，在進(jìn)行合理解釋的前提下亦可采用。
1.環(huán)比試驗(yàn)
各機(jī)構(gòu)檢測(cè)結(jié)果的陽(yáng)性符合率應(yīng)不低于85%，陰性符合率應(yīng)不低于85%，置信水平取0.05。研究者應(yīng)設(shè)定合理的Δ值，據(jù)此估算環(huán)比試驗(yàn)所有成對(duì)比較結(jié)果中陽(yáng)性病例數(shù)及陰性病例數(shù)。在保證合理的允許誤差的前提下，臨床試驗(yàn)中，環(huán)比試驗(yàn)樣本集中樣本例數(shù)不應(yīng)低于60例，其中陽(yáng)性不應(yīng)低于30例，陰性病例不低于30。環(huán)比試驗(yàn)樣本集構(gòu)建過(guò)程中，提供的陽(yáng)性樣本及陰性樣本應(yīng)盡量均衡。
2.閱片一致性研究
2.1機(jī)構(gòu)內(nèi)同一病理醫(yī)師閱片一致性研究、不同病理醫(yī)師閱片一致性研究
該部分研究應(yīng)以每個(gè)臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)為單位，進(jìn)行樣本量估算。樣本量估算過(guò)程中應(yīng)選定合理的主要評(píng)價(jià)指標(biāo)，如基于與參考結(jié)果的一致性評(píng)價(jià)或成對(duì)結(jié)果的一致性評(píng)價(jià)。各機(jī)構(gòu)可以采用同一病理醫(yī)師多次閱片匯總統(tǒng)計(jì)或不同病理醫(yī)師匯總統(tǒng)計(jì)的陽(yáng)性一致率（或平均陽(yáng)性一致率）、陰性一致率（或平均陰性一致率）進(jìn)行陽(yáng)性及陰性病例的估算，最終入組的病例應(yīng)為估算病例的1/3。樣本量估算過(guò)程應(yīng)相關(guān)參數(shù)的設(shè)定應(yīng)科學(xué)、合理，該部分研究臨床性能不應(yīng)低于環(huán)比試驗(yàn)，置信水平取0.05。研究者應(yīng)設(shè)定合理的Δ值，當(dāng)預(yù)期值更高時(shí)還應(yīng)考慮更優(yōu)的精度。
2.2不同機(jī)構(gòu)間閱片一致性研究
該部分研究應(yīng)以三家機(jī)構(gòu)提供的切片集進(jìn)行樣本量估算，樣本量估算過(guò)程中主要評(píng)價(jià)指標(biāo)的選擇應(yīng)為每家臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)與參考方法或與其他機(jī)構(gòu)對(duì)比的陽(yáng)性一致率、陰性一致率。樣本量估算過(guò)程中相關(guān)參數(shù)的設(shè)定應(yīng)科學(xué)、合理，該部分研究臨床性能不應(yīng)低于環(huán)比試驗(yàn)，不應(yīng)高于機(jī)構(gòu)內(nèi)同一病理醫(yī)師閱片一致性研究、不同病理醫(yī)師閱片一致性研究，置信水平取0.05。研究者應(yīng)設(shè)定合理的Δ值，當(dāng)預(yù)期值更高時(shí)還應(yīng)考慮更優(yōu)的精度。據(jù)此估算的樣量應(yīng)為本研究切片集樣本量，切片集由三家臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)提供，各機(jī)構(gòu)提供的陰性及陽(yáng)性切片的數(shù)量應(yīng)相對(duì)均衡。
2.3在科學(xué)合理設(shè)計(jì)的前提下，機(jī)構(gòu)內(nèi)同一病理醫(yī)師閱片一致性研究、不同病理醫(yī)師閱片一致性研究及不同機(jī)構(gòu)間閱片一致性研究三個(gè)研究中切片可重復(fù)使用。重復(fù)使用切片過(guò)程中應(yīng)避免同一病理醫(yī)師在短時(shí)間內(nèi)對(duì)同一張切片多次判讀。
（五）評(píng)價(jià)指標(biāo)及統(tǒng)計(jì)分析
環(huán)比試驗(yàn)及閱片一致性研究統(tǒng)計(jì)方法為一致性評(píng)價(jià)，可采用四格表分析的方法。包括與參考結(jié)果的一致性評(píng)價(jià)及成對(duì)結(jié)果的一致性評(píng)價(jià)。參考結(jié)果一般為同一樣本或同一個(gè)染色切片在不同閱片者判讀過(guò)程中，出現(xiàn)頻率最多的結(jié)果。與參考結(jié)果對(duì)比過(guò)程中主要評(píng)價(jià)考核試劑與參考結(jié)果的陽(yáng)性一致率（PPA）、陰性一致率（NPA）、總一致率（OA）。成對(duì)結(jié)果的一致性評(píng)價(jià)主要評(píng)價(jià)研究者兩兩成對(duì)比較的結(jié)果，成對(duì)一致性評(píng)價(jià)指標(biāo)為平均陽(yáng)性一致率（APA）、平均陰性一致率（ANA）、平均總一致率（OA）。上述統(tǒng)計(jì)分析應(yīng)采用合理的方法進(jìn)行置信區(qū)間的估算。
1．環(huán)比試驗(yàn)
環(huán)比試驗(yàn)的統(tǒng)計(jì)分析主要為各臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)間結(jié)果的兩兩成對(duì)比較，成對(duì)分析包括以下三組：機(jī)構(gòu)1與機(jī)構(gòu)2、機(jī)構(gòu)2與機(jī)構(gòu)3、機(jī)構(gòu)3與機(jī)構(gòu)1。以第一組機(jī)構(gòu)1與機(jī)構(gòu)2成對(duì)分析為例，以機(jī)構(gòu)1的結(jié)果為準(zhǔn)，以四格表形式統(tǒng)計(jì)機(jī)構(gòu)2結(jié)果與機(jī)構(gòu)1結(jié)果的一致率，包括陽(yáng)性一致率及陰性一致率。根據(jù)上述方法分析機(jī)構(gòu)2與機(jī)構(gòu)3、機(jī)構(gòu)3與機(jī)構(gòu)1的一致率。最終將三組結(jié)果匯總，分析環(huán)比試驗(yàn)的平均陽(yáng)性一致率、平均陰性一致率及平均總一致率。
2．閱片一致性研究
閱片一致性研究統(tǒng)計(jì)分析包括與參考結(jié)果的一致性評(píng)價(jià)及成對(duì)結(jié)果的一致性評(píng)價(jià)。
2.1 機(jī)構(gòu)內(nèi)同一病理醫(yī)師閱片一致性研究
與參考結(jié)果的一致性評(píng)價(jià)，每張病理切片的參考結(jié)果為本機(jī)構(gòu)同一位病理醫(yī)師多次閱片結(jié)果中，出現(xiàn)頻率最多的結(jié)果。病理醫(yī)師單次閱片結(jié)果分別與該參考結(jié)果進(jìn)行比對(duì)，評(píng)價(jià)陽(yáng)性一致率、陰性一致率及總一致率，三次閱片結(jié)果匯總為該機(jī)構(gòu)同一病理醫(yī)師閱片一致性，三家機(jī)構(gòu)結(jié)果匯總為所有機(jī)構(gòu)同一病理醫(yī)師閱片一致性研究。
同一病理醫(yī)師成對(duì)結(jié)果的一致性評(píng)價(jià)，評(píng)價(jià)過(guò)程包括三組：第1次閱片與第2次閱片、第2次閱片與第3次閱片、第3次閱片與第1次閱片。以第一組第1次閱片與第2次閱片成對(duì)分析為例，以第1次閱片的結(jié)果為準(zhǔn)，以四格表形式統(tǒng)計(jì)第2次閱片的結(jié)果與第1次閱片結(jié)果的一致率，包括陽(yáng)性一致率及陰性一致率。根據(jù)上述方法分析第2次閱片與第3次閱片、第3次閱片與第1次閱片的一致率。最終將三組結(jié)果匯總，分析機(jī)構(gòu)內(nèi)同一醫(yī)生閱片的平均陽(yáng)性一致率、平均陰性一致率及平均總一致率。三家機(jī)構(gòu)結(jié)果匯總為所有機(jī)構(gòu)同一病理醫(yī)師閱片一致性研究。
2.2機(jī)構(gòu)內(nèi)不同病理醫(yī)師閱片一致性研究
與參考結(jié)果的一致性評(píng)價(jià)，每張病理切片的參考結(jié)果為本機(jī)構(gòu)三位病理醫(yī)師閱片結(jié)果中，出現(xiàn)頻率最多的結(jié)果。具體分析方法可參考本節(jié)2.1機(jī)構(gòu)內(nèi)同一病理醫(yī)師閱片一致性研究。
成對(duì)結(jié)果的一致性評(píng)價(jià)，評(píng)價(jià)過(guò)程包括三組：病理醫(yī)師1與病理醫(yī)師2、病理醫(yī)師2與病理醫(yī)師3、病理醫(yī)師3與病理醫(yī)師1。具體分析方法可參考本節(jié)2.1機(jī)構(gòu)內(nèi)同一病理醫(yī)師閱片一致性研究。
2.3機(jī)構(gòu)間病理醫(yī)師閱片一致性研究
與參考結(jié)果的一致性評(píng)價(jià)，每張病理切片的參考結(jié)果為不同機(jī)構(gòu)病理醫(yī)師閱片結(jié)果中，出現(xiàn)頻率最多的結(jié)果。具體分析方法可參考本節(jié)2.1機(jī)構(gòu)內(nèi)同一病理醫(yī)師閱片一致性研究。
成對(duì)結(jié)果的一致性評(píng)價(jià)，評(píng)價(jià)過(guò)程包括三組：機(jī)構(gòu)1閱片結(jié)果與機(jī)構(gòu)2閱片結(jié)果、機(jī)構(gòu)2閱片結(jié)果與機(jī)構(gòu)3閱片結(jié)果、機(jī)構(gòu)3閱片結(jié)果與機(jī)構(gòu)1閱片結(jié)果。具體分析方法可參考本節(jié)2.1機(jī)構(gòu)內(nèi)同一病理醫(yī)師閱片一致性研究。
（六）原始數(shù)據(jù)
1.提交病例數(shù)據(jù)匯總表，內(nèi)容應(yīng)至少包括：性別、年齡、病理診斷結(jié)果、研究者判讀結(jié)果等。
2.提交入選樣本染色代表性彩色圖片，并對(duì)染色特點(diǎn)包括組織形態(tài)、染色強(qiáng)度和背景染色特點(diǎn)進(jìn)行簡(jiǎn)要評(píng)述。
（七）偏倚控制
為了控制臨床試驗(yàn)的偏倚，各部分研究過(guò)程中應(yīng)針對(duì)病例/切片應(yīng)進(jìn)行設(shè)盲，使研究者在試驗(yàn)過(guò)程中不知曉受試者疾病診斷或其他相關(guān)檢測(cè)等信息，從而避免引入偏倚。
在進(jìn)行同一病理醫(yī)師閱片一致性研究過(guò)程中，病理醫(yī)師在進(jìn)行下一次閱片時(shí)應(yīng)保留一段時(shí)間的記憶清除期（脫敏期），此段時(shí)間一般不少于兩周。
同一病理醫(yī)師閱片一致性研究過(guò)程中，每次閱片時(shí)建議人為納入一定數(shù)量的不同的干擾病例。干擾病例應(yīng)同時(shí)具有陽(yáng)性和陰性病例，將干擾病例混入分析組中，使研究者同時(shí)針對(duì)分析組中的病例及干擾病例進(jìn)行操作，但干擾病例結(jié)果不納入統(tǒng)計(jì)分析。
（八）質(zhì)量控制
臨床試驗(yàn)開(kāi)始前，建議進(jìn)行相關(guān)培訓(xùn)，以確保研究者熟悉并掌握相關(guān)試驗(yàn)方法的操作、儀器、技術(shù)性能等，最大限度控制試驗(yàn)誤差。整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程都應(yīng)處于有效的質(zhì)量控制下，最大限度保證試驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性及可重復(fù)性。
臨床試驗(yàn)中應(yīng)制定嚴(yán)格的樣本轉(zhuǎn)運(yùn)方案，確保樣本轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程不對(duì)臨床試驗(yàn)產(chǎn)生影響，樣本轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程中應(yīng)做好樣本交接記錄，各臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)的樣本應(yīng)能夠溯源。
臨床試驗(yàn)應(yīng)嚴(yán)格按照產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，應(yīng)根據(jù)相關(guān)要求進(jìn)行必要的HE染色，應(yīng)設(shè)置合理對(duì)照。
四、起草單位
國(guó)家藥品監(jiān)督管理局醫(yī)療器械技術(shù)審評(píng)中心。
五、參考文獻(xiàn)
1.《體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》（國(guó)家藥品監(jiān)督管理局通告2021年第76號(hào)），2021年9月28日。
2.Xiao-Hua Zhou，Nancy A.Obuchowski，Donna K.McClish. 診斷醫(yī)學(xué)中的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法（第二版） [M].北京:高等教育出版社，2016。
3.李衛(wèi).醫(yī)療器械臨床試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)方法（第二版） [M].北京:科學(xué)出版社，2016。